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卵黃抗體的分析(上海精宏GNP-9270使用)

返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2020-03-26 13:55【

1 材料 


1. 1 疫苗與試驗(yàn)動(dòng)物

雞新城疫活疫苗( La Sota 株) ,購(gòu)自哈藥集團(tuán)生 物疫苗有限公司; 雞新城疫滅活疫苗( Ulster 2C 株) , 購(gòu)自南京梅里亞動(dòng)物保健有限公司; 美國(guó)王鴿( 約 1 000 只) ,淇縣某鴿場(chǎng)提供; 健康羅斯公雞( 2 kg 左 右) 2 只,市購(gòu)。

1. 2 主要試劑

檸檬酸鈉( 分析純) ,購(gòu)自天津市北辰方正試劑 廠; 氯化鈉( 分析純) ,購(gòu)自天津市恒興化學(xué)試劑制造 有限公司; 氯仿( 分析純) ,購(gòu)自洛陽昊華化學(xué)試劑有 限公司; 碘酊,購(gòu)自德州欣瑞達(dá)消毒制品有限公司; 醫(yī) 用乙醇,購(gòu)自洛陽市潔康消毒劑廠。

1. 3 主要儀器

離心機(jī)( 型號(hào)為 80-2) ,購(gòu)自上海手術(shù)器械廠; 移 液器( Research plus) ,購(gòu)自德國(guó) Eppendorf 股份有限 公司; 天平( 型號(hào)為 HC-C) ,購(gòu)自慈溪市華徐衡器實(shí) 業(yè)有限公司; 超凈工作臺(tái)( 型號(hào)為 SW-CJ-2F) ,購(gòu)自 蘇州 凈 化 設(shè) 備 有 限 公 司; 生 化 培 養(yǎng) 箱 ( 型 號(hào) 為 GNP-9270) ,購(gòu)自上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司; 高壓 蒸氣滅菌器( 型號(hào)為 LDZX-30KAS) ,購(gòu)自上海申安 醫(yī) 療 器 械 廠; 冰 箱 [型 號(hào) 為 BCD - 610 W( KA92NV02TI) ],購(gòu) 自 波 西 化 電 器 ( 安 徽) 有 限 公司。


2 方法


淇縣某鴿場(chǎng)美國(guó)王鴿( 約 1 000 只) 在 4 月齡時(shí) 用雞新城疫滅活疫苗( Ulster 2C 株) 免疫,8 月齡時(shí)再 免疫 1 次,均為胸部肌肉注射,0. 4 mL /只,10 月齡時(shí) 進(jìn)行樣本采集。用 1 mL 無菌注射器從健康產(chǎn)蛋母鴿 翅靜脈采集血液,每只鴿采集 1 份,共采集18 份, 0. 5~0. 8 mL /份,置于 1. 5 mL 無菌離心管中,做好標(biāo) 記,4 ℃保存,備用。同時(shí)收集對(duì)應(yīng)編號(hào)母鴿所產(chǎn)的 鴿蛋 18 枚,做相同編號(hào)標(biāo)記,4 ℃保存,備用。在超凈工作臺(tái)中,用碘酊擦拭鴿蛋,再用乙醇脫 碘; 用無菌鑷子敲破鴿蛋蛋殼,將蛋內(nèi)容物置于滅菌 單層紗布( 呈漏斗狀蓋于一個(gè)滅菌燒杯上,用滅菌棉 線扎緊) 上,讓蛋清慢慢流入燒杯; 收集卵黃,將其置 于另一個(gè)滅菌燒杯中,用滅菌玻璃棒充分打碎卵黃, 使卵 黃 呈 液 狀。取 卵 黃 原 液 1 mL 置 于 滅 菌 的 1. 5 mL 離心管中; 另取 1 mL 卵黃原液置于滅菌的 15 mL 離心管中。卵黃原液和卵黃抗體提取液均-20 ℃ 保存,備用。


3 結(jié)果與分析


制備的血清樣品呈黃色,黏 稠度高于提取的卵黃液,但遠(yuǎn)低于卵黃原液,易于吸 取; 提取的卵黃液透明、清亮,非 常稀薄,容易吸取; 卵黃原液呈深黃色,非常黏稠,不太容易吸取,吸取時(shí)吸頭外常有 卵黃原液殘留。






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