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米曲霉發酵提取之精宏設備應用。

返回列表 來源:未知 發布日期:2022-08-22 08:52【

    DHEA 主要依賴于化學合成,合成步驟復 雜,中間產物較多,DHEA 得率和純度不易控制。相 比之下,微生物法反應條件溫和,各種酶促反應可實 現 DHEA 充分游離。采用微生物發法,通過微生 物代謝酶對甾醇側鏈進行專一性酶解,優化了以菜籽 甾醇、谷甾醇等植物甾醇為底物高效制備 DHEA 的工 藝。SHP-250 生化培養 箱、GZX-9240 MBE 電熱鼓風干燥箱:上海精宏試驗設 備有限公司;YM 75 立式壓力蒸汽滅菌器:上海三申醫 療器械公司;SB-5200D 超聲波清洗器:寧波新芝生物 科技股份有限公司。蛋白胨與甘薯生全粉按質量比 4%混合,再按一定 液固比加入去離子水,攪拌混勻后置于 121 ℃下滅菌 15 min 得發酵培養基,按一定體積比于發酵培養基中 接種米曲霉孢子懸浮液,發酵一段時間后高溫滅菌終 止發酵,發酵后培養基冷卻后于 4 000 r/min 下離心 15 min,收集沉淀于 50℃下干燥并粉碎過 60目篩得發 酵產物。

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    隨接種量升高,DHEA 得率呈明顯 先上升后下降變化趨勢。當接種量介于 4%~10%之間 時,接種量對以甘薯生全粉為原料米曲酶發酵提取 DHEA 得率有顯著(p<0.05)影響;接種量超過 10%時, 繼續提升接種量,DHEA 得率無顯著變化;接種量為 6%時,DHEA 得率最高,達 61.32 μg/100 g。隨發酵時間延長,DHEA 得率呈顯 著先上升后下降變化趨勢(p<0.05)。發酵 36 h 時,DHEA 得率最低,僅為 12.20 μg/100 g;發酵 72 h 時,DHEA 得 率最高,為 79.34 μg/100 g。研究表明,發酵48 h~72 h 是 米曲霉生長繁殖的高峰期,發酵時間不足,發酵液中菌 絲體絕對數量不高,產酶不足進而影響 DHEA 得率; 發酵時間太長,培養基中營養物質消耗過多,米曲酶生 長減緩甚至衰亡,可水解糖苷鍵等酶的產量降低[20],導 致培養基中 DHEA 不能充分游離,最終其得率下降。




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